Protoplas isolasi, budaya dan fusi
genom untuk menghasilkan hibrida somatik, hibrida asimetris atau cybrids
ProductionCombining rekombinan organel
Transfer pria sterilitas sitoplasma
genom untuk menghasilkan hibrida somatik, hibrida asimetris atau cybrids
ProductionCombining rekombinan organel
Transfer pria sterilitas sitoplasma
Micrografting
Mengatasi korupsi ketidakcocokan
Mass rapid propagasi scions elit dengan mencangkok batang bawah yang memiliki ke sifat yang diinginkan seperti resistensi terhadap tanah-patogen dan penyakit
Untuk memungkinkan kelangsungan hidup sulit untuk tunas akar
Pengembangan tanaman bebas virus
Mengatasi korupsi ketidakcocokan
Mass rapid propagasi scions elit dengan mencangkok batang bawah yang memiliki ke sifat yang diinginkan seperti resistensi terhadap tanah-patogen dan penyakit
Untuk memungkinkan kelangsungan hidup sulit untuk tunas akar
Pengembangan tanaman bebas virus
transformasi genetik
Eksplan yang berbeda dapat digunakan, tergantung pada spesies tanaman dan metode istimewa kepada regenerasi serta metode transformasi
Pengenalan DNA asing untuk menghasilkan baru (dan biasanya diinginkan) kombinasi genetik
Digunakan untuk mempelajari fungsi gen
Eksplan yang berbeda dapat digunakan, tergantung pada spesies tanaman dan metode istimewa kepada regenerasi serta metode transformasi
Pengenalan DNA asing untuk menghasilkan baru (dan biasanya diinginkan) kombinasi genetik
Digunakan untuk mempelajari fungsi gen
Kondisi apa sel-sel tumbuhan perlu mengalikan in vitro?
Kultur jaringan memiliki beberapa persyaratan penting:
Sesuai jaringan (kultur jaringan beberapa yang lebih baik daripada yang lain)
Sebuah media yang cocok pertumbuhan yang mengandung sumber energi dan garam-garam anorganik untuk memasok kebutuhan pertumbuhan sel. Hal ini dapat cair atau semipadat
Aseptik (steril) kondisi, seperti mikroorganisme tumbuh jauh lebih cepat daripada jaringan tanaman dan hewan dan dapat dikuasai budaya.
Pertumbuhan regulator - pada tanaman, baik auksin sitokinin &.
Sering subkultur untuk menjamin nutrisi yang memadai dan untuk menghindari membangun-up dari metabolit limbah
Kultur jaringan memiliki beberapa persyaratan penting:
Sesuai jaringan (kultur jaringan beberapa yang lebih baik daripada yang lain)
Sebuah media yang cocok pertumbuhan yang mengandung sumber energi dan garam-garam anorganik untuk memasok kebutuhan pertumbuhan sel. Hal ini dapat cair atau semipadat
Aseptik (steril) kondisi, seperti mikroorganisme tumbuh jauh lebih cepat daripada jaringan tanaman dan hewan dan dapat dikuasai budaya.
Pertumbuhan regulator - pada tanaman, baik auksin sitokinin &.
Sering subkultur untuk menjamin nutrisi yang memadai dan untuk menghindari membangun-up dari metabolit limbah
polyphenolic
Banyak tanaman yang kaya polyphenolic
Setelah cedera jaringan selama diseksi, senyawa tersebut akan teroksidasi oleh polifenol oksidase → jaringan berubah menjadi cokelat / hitam
Produk fenolik menghambat aktivitas enzim dan dapat membunuh eksplan
Metode untuk mengatasi kecoklatan:
menambahkan antioksidan [asam askorbat, asam sitrat, PVP (polivinilpirolidon), dithiothreitol], arang aktif atau presoaking eksplan dalam antioksidan
mengerami periode awal kultur dalam cahaya berkurang / gelap
sering transfer ke media segar
Banyak tanaman yang kaya polyphenolic
Setelah cedera jaringan selama diseksi, senyawa tersebut akan teroksidasi oleh polifenol oksidase → jaringan berubah menjadi cokelat / hitam
Produk fenolik menghambat aktivitas enzim dan dapat membunuh eksplan
Metode untuk mengatasi kecoklatan:
menambahkan antioksidan [asam askorbat, asam sitrat, PVP (polivinilpirolidon), dithiothreitol], arang aktif atau presoaking eksplan dalam antioksidan
mengerami periode awal kultur dalam cahaya berkurang / gelap
sering transfer ke media segar
Sebuah media
nutrisi didefinisikan oleh
komposisi garam mineral, sumber karbon, vitamin, pengatur pertumbuhan tanaman dan suplemen
organik lainnya.
pH menentukan banyak aspek penting dari struktur dan aktivitas makromolekul biologis. PH optimum 5,0-6,0 cenderung turun selama autoklaf dan pertumbuhan.
pH menentukan banyak aspek penting dari struktur dan aktivitas makromolekul biologis. PH optimum 5,0-6,0 cenderung turun selama autoklaf dan pertumbuhan.
Tunas sel meristem mempertahankan kapasitas embrio untuk pembelahan
terbatas.
Isolated eksplan meristem kecil membutuhkan media kultur yang lebih kompleks untuk bertahan hidup.
Meristem dan kultur meristem tip adalah metode untuk pemberantasan penyakit.
Budaya Tembak menyediakan sarana untuk berkembang biak chimeras periclinal.
Sitokinin mengganggu dominasi apikal dan meningkatkan produksi menembak aksila.
Peningkatan konsentrasi auksin meningkatkan perakaran Persentase dan jumlah akar, tetapi menurunkan pemanjangan akar.
Efek akumulasi negatif dari auksin digunakan untuk Tahap III perakaran dapat mempengaruhi kelangsungan hidup dan pertumbuhan in vitro mantan plantlet.
Isolated eksplan meristem kecil membutuhkan media kultur yang lebih kompleks untuk bertahan hidup.
Meristem dan kultur meristem tip adalah metode untuk pemberantasan penyakit.
Budaya Tembak menyediakan sarana untuk berkembang biak chimeras periclinal.
Sitokinin mengganggu dominasi apikal dan meningkatkan produksi menembak aksila.
Peningkatan konsentrasi auksin meningkatkan perakaran Persentase dan jumlah akar, tetapi menurunkan pemanjangan akar.
Efek akumulasi negatif dari auksin digunakan untuk Tahap III perakaran dapat mempengaruhi kelangsungan hidup dan pertumbuhan in vitro mantan plantlet.
Tidak ada sambungan ke sistem vaskular dari
batang
Sebuah meristem apikal dicotyledonous menembak khas terdiri dari kubah berlapis aktif membagi sel yang terletak di ujung ekstrim menembak, dan ukuran sekitar 0,1 sampai 0,2 mm dengan diameter dan 0,2 sampai 0,3 mm panjang.
Meristem apikal tidak memiliki koneksi ke sistem pembuluh darah batang. Di bawah meristem apikal, daerah lokal pembelahan sel dan pemanjangan merupakan situs baru berkembang primordia daun.
Tunas lateral, masing-masing berisi meristem apikal, mengembangkan dalam axils daun subtending. Dalam tanaman utuh, perkembangan dari tunas lateral biasanya dihambat oleh dominasi apikal tunas ujung terminal.
Pertumbuhan tunas terorganisir dari meristem apikal tanaman berpotensi terbatas dan dikatakan tak tentu.
Namun, meristem apikal menembak dapat menjadi berkomitmen untuk pembentukan organ determinate seperti bunga
Sebuah meristem apikal dicotyledonous menembak khas terdiri dari kubah berlapis aktif membagi sel yang terletak di ujung ekstrim menembak, dan ukuran sekitar 0,1 sampai 0,2 mm dengan diameter dan 0,2 sampai 0,3 mm panjang.
Meristem apikal tidak memiliki koneksi ke sistem pembuluh darah batang. Di bawah meristem apikal, daerah lokal pembelahan sel dan pemanjangan merupakan situs baru berkembang primordia daun.
Tunas lateral, masing-masing berisi meristem apikal, mengembangkan dalam axils daun subtending. Dalam tanaman utuh, perkembangan dari tunas lateral biasanya dihambat oleh dominasi apikal tunas ujung terminal.
Pertumbuhan tunas terorganisir dari meristem apikal tanaman berpotensi terbatas dan dikatakan tak tentu.
Namun, meristem apikal menembak dapat menjadi berkomitmen untuk pembentukan organ determinate seperti bunga
Kultur in vitro pada meristem SHOOT
Beberapa temuan penting difasilitasi aplikasi dalam teknik kultur in vitro untuk skala besar perbanyakan klonal dari meristem.
Penemuan bahwa virus-diberantas tanaman dapat dihasilkan dari kultur meristem mengarah ke aplikasi luas prosedur untuk pemberantasan patogen jamur dan bakteri rutin serta
Penemuan terakhir adalah penjelasan tentang peran sitokinin dalam penghambatan dominasi apikal.
Temuan ini akhirnya diterapkan untuk meningkatkan produksi menembak aksila in vitro
Penerapan metode ini dipercepat oleh perkembangan media kultur baik yang mendukung propagasi dari keanekaragaman jenis tumbuhan
Beberapa temuan penting difasilitasi aplikasi dalam teknik kultur in vitro untuk skala besar perbanyakan klonal dari meristem.
Penemuan bahwa virus-diberantas tanaman dapat dihasilkan dari kultur meristem mengarah ke aplikasi luas prosedur untuk pemberantasan patogen jamur dan bakteri rutin serta
Penemuan terakhir adalah penjelasan tentang peran sitokinin dalam penghambatan dominasi apikal.
Temuan ini akhirnya diterapkan untuk meningkatkan produksi menembak aksila in vitro
Penerapan metode ini dipercepat oleh perkembangan media kultur baik yang mendukung propagasi dari keanekaragaman jenis tumbuhan
budidaya TAHAP
TAHAP 0: DONOR PLANT SELEKSI DAN PERSIAPAN
Eksplan kualitas dan respon berikutnya secara in vitro secara signifikan dipengaruhi oleh kondisi fitosanitasi dan fisiologis dari tanaman donor
Sebelum pembentukan budaya, perhatian diberikan kepada pemilihan dan pemeliharaan tanaman saham digunakan sebagai sumber eksplan.
Tanaman saham dipertahankan dalam bersih, kondisi yang terkendali yang memungkinkan pertumbuhan aktif namun mengurangi kemungkinan penyakit.
Pemeliharaan spesifik patogen-tanaman saham diuji di bawah kondisi kelembaban relatif lebih rendah, serta penggunaan irigasi tetes dan semprotan antibiotik, telah terbukti efektif dalam mengurangi potensi kontaminasi eksplan calon.
TAHAP 0: DONOR PLANT SELEKSI DAN PERSIAPAN
Eksplan kualitas dan respon berikutnya secara in vitro secara signifikan dipengaruhi oleh kondisi fitosanitasi dan fisiologis dari tanaman donor
Sebelum pembentukan budaya, perhatian diberikan kepada pemilihan dan pemeliharaan tanaman saham digunakan sebagai sumber eksplan.
Tanaman saham dipertahankan dalam bersih, kondisi yang terkendali yang memungkinkan pertumbuhan aktif namun mengurangi kemungkinan penyakit.
Pemeliharaan spesifik patogen-tanaman saham diuji di bawah kondisi kelembaban relatif lebih rendah, serta penggunaan irigasi tetes dan semprotan antibiotik, telah terbukti efektif dalam mengurangi potensi kontaminasi eksplan calon.
Meningkatkan respon eksplan
Sejumlah praktek juga digunakan untuk meningkatkan respon eksplan dengan memodifikasi status fisiologis tanaman saham. Ini meliputi:
Pemangkasan untuk merangsang pertumbuhan tunas lateral yang
Pretreatment semprotan yang mengandung sitokinin atau asam giberelat
Penggunaan solusi memaksa mengandung sukrosa 2% dan 200 mg / l 8-hydroxyquinoline sitrat untuk induksi tunas istirahat dan pengiriman zat pengatur tumbuh untuk target jaringan eksplan
Sejumlah praktek juga digunakan untuk meningkatkan respon eksplan dengan memodifikasi status fisiologis tanaman saham. Ini meliputi:
Pemangkasan untuk merangsang pertumbuhan tunas lateral yang
Pretreatment semprotan yang mengandung sitokinin atau asam giberelat
Penggunaan solusi memaksa mengandung sukrosa 2% dan 200 mg / l 8-hydroxyquinoline sitrat untuk induksi tunas istirahat dan pengiriman zat pengatur tumbuh untuk target jaringan eksplan
TAHAP I: PEMBENTUKAN BUDAYA secara aseptis
Adanya mikroba kontaminan dapat mempengaruhi kelangsungan hidup menembak, pertumbuhan, dan tingkat multiplikasi. Bakteri dan jamur kontaminan sering bertahan dalam jaringan budidaya yang muncul visual bebas kontaminan. Akibatnya, adalah penting bahwa Tahap I budaya diindeks (disaring) untuk kehadiran kontaminan mikroba internal yang sebelum untuk melayani sebagai sumber eksplan ujung menembak dan nodal untuk perkalian Tahap II
Faktor-faktor berikut dapat mempengaruhi Tahap berhasil saya pembentukan eksplan meristem: waktu explantation, posisi eksplan pada batang, ukuran eksplan, dan oksidasi polifenol. Waktu explantation secara signifikan dapat mempengaruhi respon eksplan in vitro.
Pada tanaman keras berkayu gugur, menembak kiat eksplan dikumpulkan pada berbagai waktu selama musim semi siram pertumbuhan dapat bervariasi dalam kemampuan mereka untuk proliferasi menembak
Adanya mikroba kontaminan dapat mempengaruhi kelangsungan hidup menembak, pertumbuhan, dan tingkat multiplikasi. Bakteri dan jamur kontaminan sering bertahan dalam jaringan budidaya yang muncul visual bebas kontaminan. Akibatnya, adalah penting bahwa Tahap I budaya diindeks (disaring) untuk kehadiran kontaminan mikroba internal yang sebelum untuk melayani sebagai sumber eksplan ujung menembak dan nodal untuk perkalian Tahap II
Faktor-faktor berikut dapat mempengaruhi Tahap berhasil saya pembentukan eksplan meristem: waktu explantation, posisi eksplan pada batang, ukuran eksplan, dan oksidasi polifenol. Waktu explantation secara signifikan dapat mempengaruhi respon eksplan in vitro.
Pada tanaman keras berkayu gugur, menembak kiat eksplan dikumpulkan pada berbagai waktu selama musim semi siram pertumbuhan dapat bervariasi dalam kemampuan mereka untuk proliferasi menembak
Inherent faktor
Eksplan juga menunjukkan kapasitas yang berbeda untuk pembentukan in vitro tergantung pada lokasi mereka pada tanaman donor. Sebagai contoh, kelangsungan hidup dan pertumbuhan eksplan tunas terminal biasanya lebih besar dari eksplan tunas lateral yang
Eksisi (pemotongan) dari eksplan primer sering mempromosikan pelepasan polifenol dan aktivitas oksidase stimulatespolyphenol dalam jaringan yang rusak.
Pengetahuan tentang situs tertentu biosintesis hormon dalam tanaman utuh memberikan wawasan ke dalam hubungan antara ukuran eksplan dan ketergantungan pada pengatur tumbuh eksogen dalam medium. Sitokinin endogen dan auksin disintesis terutama di ujung akar dan primordia daun, masing-masing.
Akibatnya, eksplan yang lebih kecil, terutama berbudaya kubah meristem apikal, menunjukkan ketergantungan lebih besar pada suplementasi menengah dengan sitokinin eksogen dan auksin untuk kelangsungan hidup menembak maksimum dan pengembangan
Eksplan juga menunjukkan kapasitas yang berbeda untuk pembentukan in vitro tergantung pada lokasi mereka pada tanaman donor. Sebagai contoh, kelangsungan hidup dan pertumbuhan eksplan tunas terminal biasanya lebih besar dari eksplan tunas lateral yang
Eksisi (pemotongan) dari eksplan primer sering mempromosikan pelepasan polifenol dan aktivitas oksidase stimulatespolyphenol dalam jaringan yang rusak.
Pengetahuan tentang situs tertentu biosintesis hormon dalam tanaman utuh memberikan wawasan ke dalam hubungan antara ukuran eksplan dan ketergantungan pada pengatur tumbuh eksogen dalam medium. Sitokinin endogen dan auksin disintesis terutama di ujung akar dan primordia daun, masing-masing.
Akibatnya, eksplan yang lebih kecil, terutama berbudaya kubah meristem apikal, menunjukkan ketergantungan lebih besar pada suplementasi menengah dengan sitokinin eksogen dan auksin untuk kelangsungan hidup menembak maksimum dan pengembangan
TAHAP II:
proliferasi tunas aksila
Stadium II propagasi ditandai oleh pembentukan tunas ditingkatkan berulang aksilaris dari tips menembak atau tunas lateral dikultur pada medium dilengkapi dengan tingkat sitokinin yang relatif lebih tinggi untuk mengganggu dominasi apikal tunas ujung
Stadium II propagasi ditandai oleh pembentukan tunas ditingkatkan berulang aksilaris dari tips menembak atau tunas lateral dikultur pada medium dilengkapi dengan tingkat sitokinin yang relatif lebih tinggi untuk mengganggu dominasi apikal tunas ujung
TAHAP III: PRETRANSPLANT (rooting)
Pemanjangan tunas sebelum perakaran
Perakaran tunas individu atau rumpun menembak
Memenuhi persyaratan dormansi organ penyimpanan dengan pengobatan dingin
Prehardening budaya untuk meningkatkan kelangsungan hidup
Perkiraan biaya untuk rentang Tahap III dari 35% sampai 75% dari total biaya produksi. Ini mencerminkan masukan yang signifikan dari tenaga kerja dan perlengkapan yang dibutuhkan untuk menyelesaikan Tahap III perakaran.
Pemanjangan tunas sebelum perakaran
Perakaran tunas individu atau rumpun menembak
Memenuhi persyaratan dormansi organ penyimpanan dengan pengobatan dingin
Prehardening budaya untuk meningkatkan kelangsungan hidup
Perkiraan biaya untuk rentang Tahap III dari 35% sampai 75% dari total biaya produksi. Ini mencerminkan masukan yang signifikan dari tenaga kerja dan perlengkapan yang dibutuhkan untuk menyelesaikan Tahap III perakaran.
TAHAP IV: TRANSFER KE LINGKUNGAN ALAM
Hal ini melibatkan acclimatizing atau pengerasan dari plantlet dengan kondisi kelembaban relatif jauh lebih rendah dan intensitas cahaya yang lebih tinggi. Bahkan ketika prosedur aklimatisasi secara hati-hati diikuti, tingkat kelangsungan hidup miskin sering ditemui.
Tanaman Micropropagated sulit untuk transplantasi karena dua alasan utama: modus heterotrofik gizi, dan kontrol miskin kehilangan air.
Tanaman berbudaya in vitro di hadapan sukrosa dan di bawah kondisi cahaya terbatas dan pertukaran gas tidak menunjukkan atau sangat mengurangi kapasitas untuk fotosintesis.
Mengurangi aktivitas fotosintetik dikaitkan dengan aktivitas RubPcase rendah. Selama aklimatisasi, ada kebutuhan bagi tanaman untuk membuat transisi cepat dari heterotrofik ke keadaan photoautotrophic untuk bertahan hidup.
Hal ini melibatkan acclimatizing atau pengerasan dari plantlet dengan kondisi kelembaban relatif jauh lebih rendah dan intensitas cahaya yang lebih tinggi. Bahkan ketika prosedur aklimatisasi secara hati-hati diikuti, tingkat kelangsungan hidup miskin sering ditemui.
Tanaman Micropropagated sulit untuk transplantasi karena dua alasan utama: modus heterotrofik gizi, dan kontrol miskin kehilangan air.
Tanaman berbudaya in vitro di hadapan sukrosa dan di bawah kondisi cahaya terbatas dan pertukaran gas tidak menunjukkan atau sangat mengurangi kapasitas untuk fotosintesis.
Mengurangi aktivitas fotosintetik dikaitkan dengan aktivitas RubPcase rendah. Selama aklimatisasi, ada kebutuhan bagi tanaman untuk membuat transisi cepat dari heterotrofik ke keadaan photoautotrophic untuk bertahan hidup.
Propagasi
dari Jaringan Nonmeristematic:
Embriogenesis Nonzygotic
• embriogenesis Nonzygotic terjadi di antara sel yang
berbeda secara luas dan jenis jaringan
dan dapat dianggap sebagai kemampuan
universal tumbuhan tingkat tinggi.
• embrio Nonzygotic tampaknya berasal dari sel tunggal, bukan sebagai hasil dari reproduksi seksual, tetapi sebaliknya identik dengan rekan-rekan zigotik mereka.
• embriogenesis Nonzygotic meyakinkan menunjukkan totipotency seluler dan merupakan metode yang sangat efisien perbanyakan tanaman.
• kultur sel embriogenik yang banyak digunakan untuk manipulasi genetik seperti seleksi in vitro dan teknologi transgenik.
• embrio Nonzygotic tampaknya berasal dari sel tunggal, bukan sebagai hasil dari reproduksi seksual, tetapi sebaliknya identik dengan rekan-rekan zigotik mereka.
• embriogenesis Nonzygotic meyakinkan menunjukkan totipotency seluler dan merupakan metode yang sangat efisien perbanyakan tanaman.
• kultur sel embriogenik yang banyak digunakan untuk manipulasi genetik seperti seleksi in vitro dan teknologi transgenik.
Embrio dapat didefinisikan sebagai tahap awal multiseluler dikenali
dari seorang individu yang terjadi
sebelum mereka telah mengembangkan struktur atau organ karakteristik
suatu spesies.
Pada sebagian besar organisme, embrio adalah entitas morfologis berbeda yang berfungsi sebagai tahap peralihan dalam transisi antara gametophytic untuk siklus hidup sporophytic.
Pada sebagian besar organisme, embrio adalah entitas morfologis berbeda yang berfungsi sebagai tahap peralihan dalam transisi antara gametophytic untuk siklus hidup sporophytic.
Zigotik embrio zigotik dan
bukan
Pada tumbuhan tingkat tinggi, kita paling akrab
dengan embrio yang berkembang di dalam
benih; embrio seperti
biasanya muncul dari fusi gamet produk (zigot)
berikut reproduksi seksual dan disebut embrio
zigotik, meskipun benih ditanggung embrio juga
dapat mengembangkan apomictically (yaitu, tanpa reproduksi
seksual ).Namun, tanaman yang unik dalam morfologi
dan fungsional nonzygotic embrio yang benar juga
bisa muncul dari sel yang berbeda secara luas dan jenis jaringan di sejumlah titik yang berbeda dari kedua fase gametophytic dan
sporophytic dari siklus hidup.
Embriogenik sistem kultur
"Somatik embrio" tumbuh dari sel-sel somatik; "embrio
haploid atau serbuk sari" yang berasal dari serbuk
sari atau sel ibu mikrospora; "embrio nucellar" terbentuk dari jaringan benih nonzygotic
nucellar; "embrio sekunder langsung" berkembang dari embrio yang
terbentuk sebelumnya, dan sebagainya pada ....Sebagian besar jenis embrio berbagi ciri
umum untuk dapat dimanipulasi
melalui kultur in vitro. Seperti
sistem budaya embriogenik membentuk dasar untuk pendekatan bioteknologi banyak perbaikan
tanaman karena mereka memungkinkan
tidak hanya perbanyakan tanaman klonal,
tetapi juga perubahan spesifik dan
diarahkan yang dapat diperkenalkan ke dalam diinginkan, individu elit dengan
rekayasa genetik dari sel somatik. Sel-sel individual dimodifikasi dan embrio kemudian dapat efisien
dikalikan in vitro untuk nomor yang sangat tinggi
sebelum pengembangan tanaman. Pendekatan
ini untuk perbaikan genetik bypasses
konsekuensi yang tidak diinginkan
reproduksi seksual (rekombinasi genetik massa
dan siklus diperlukan seleksi) yang melekat dalam
teknologi pemuliaan konvensional.
SIFAT UMUM DARI PROTOKOL KULTUR embriogenik
Mengingat berbagai eksplan yang berbeda, budaya kondisi dan media yang digunakan untuk memulai dan mempertahankan budaya embriogenik, generalisasi tertentu dapat dibuat mengenai metodologi dasar.
Penggunaan zat pengatur tumbuh tanaman tertentu (PGRS), yang diperlukan dalam kebanyakan kasus, akan dibahas kemudian sehubungan dengan inisiasi sel embriogenik.
Persyaratan lingkungan untuk pertumbuhan optimal kultur sering sangat spesifik, tapi tidak biasa. Budaya mungkin memerlukan pertumbuhan baik dalam gelap atau cahaya atau kombinasi keduanya dari waktu ke waktu, optimalisasi yang dapat diukur secara eksperimental.
Budaya dalam kegelapan mungkin diperlukan untuk mencegah efek cahaya pada memicu proses biologis yang banyak tanaman dapat mempengaruhi pertumbuhan populasi sel embriogenik.
Persyaratan temperatur juga spesifik, tetapi cenderung berada dalam kisaran "suhu kamar" (yaitu, 23-27 ° C). Meskipun kesamaan dalam persyaratan budaya, perbaikan dalam pengembangan dan pematangan embrio nonzygotic semakin sering diperoleh dengan optimasi komposisi media
Mengingat berbagai eksplan yang berbeda, budaya kondisi dan media yang digunakan untuk memulai dan mempertahankan budaya embriogenik, generalisasi tertentu dapat dibuat mengenai metodologi dasar.
Penggunaan zat pengatur tumbuh tanaman tertentu (PGRS), yang diperlukan dalam kebanyakan kasus, akan dibahas kemudian sehubungan dengan inisiasi sel embriogenik.
Persyaratan lingkungan untuk pertumbuhan optimal kultur sering sangat spesifik, tapi tidak biasa. Budaya mungkin memerlukan pertumbuhan baik dalam gelap atau cahaya atau kombinasi keduanya dari waktu ke waktu, optimalisasi yang dapat diukur secara eksperimental.
Budaya dalam kegelapan mungkin diperlukan untuk mencegah efek cahaya pada memicu proses biologis yang banyak tanaman dapat mempengaruhi pertumbuhan populasi sel embriogenik.
Persyaratan temperatur juga spesifik, tetapi cenderung berada dalam kisaran "suhu kamar" (yaitu, 23-27 ° C). Meskipun kesamaan dalam persyaratan budaya, perbaikan dalam pengembangan dan pematangan embrio nonzygotic semakin sering diperoleh dengan optimasi komposisi media
Zigotik dan Non zigotik
Perbandingan embrio zigotik yang khas terjadi di dalam biji (A) dengan embriogenesis nonzygotic terjadi proliferasi in vitro (B). Embriogenesis zigotik ditandai sebagai sangat diatur, seperti bahwa embrio melewati tahap serentak perkembangan yang berbeda, sedangkan embriogenesis nonzygotic sering tidak seragam, dengan tahapan yang hadir pada waktu tertentu. Embrio Nonzygotic dapat melewati pematangan dan menjadi tidak teratur, menambah massa jaringan proembryonic.
Perbandingan embrio zigotik yang khas terjadi di dalam biji (A) dengan embriogenesis nonzygotic terjadi proliferasi in vitro (B). Embriogenesis zigotik ditandai sebagai sangat diatur, seperti bahwa embrio melewati tahap serentak perkembangan yang berbeda, sedangkan embriogenesis nonzygotic sering tidak seragam, dengan tahapan yang hadir pada waktu tertentu. Embrio Nonzygotic dapat melewati pematangan dan menjadi tidak teratur, menambah massa jaringan proembryonic.
embrio perkembangan
Embrio zigotik dan nonzygotic
berbagi pola kotor
sama pembangunan, dengan kedua biasanya melewati
tahap globular, scutellar,
dan coleoptilar untuk monokotil, atau bulat, jantung,
torpedo, dan tahap cotyledonary untuk dicots
dan tumbuhan runjung. Umumnya, anatomi dan
morfologi embrio yang berkembang
baik nonzygotic setia dengan jenis embrio zigotik
yang sesuai, sehingga mereka dapat
dengan mudah diidentifikasi oleh mata
atau dengan bantuan mikroskop
stereo yang.
pematangan
Pematangan adalah peristiwa terminal embriogenesis dan ditandai oleh pencapaian morfologi embrio dewasa; akumulasi karbohidrat penyimpanan, lipid, dan protein (lihat bagian di atas pada in vivo dibandingkan dalam kondisi pertumbuhan in vitro), pengurangan kandungan air, dan, sering , sebuah penurunan bertahap atau penghentian metabolisme. Nonzygotic embrio biasanya tidak matang benar jika dibandingkan dengan embrio zigotik. Bahkan, dalam kasus dominan, pertumbuhan yang cepat terus terjadi, menyebabkan perkecambahan prekoks.
Pematangan adalah peristiwa terminal embriogenesis dan ditandai oleh pencapaian morfologi embrio dewasa; akumulasi karbohidrat penyimpanan, lipid, dan protein (lihat bagian di atas pada in vivo dibandingkan dalam kondisi pertumbuhan in vitro), pengurangan kandungan air, dan, sering , sebuah penurunan bertahap atau penghentian metabolisme. Nonzygotic embrio biasanya tidak matang benar jika dibandingkan dengan embrio zigotik. Bahkan, dalam kasus dominan, pertumbuhan yang cepat terus terjadi, menyebabkan perkecambahan prekoks.
TEKNOLOGI BENIH SINTETIS
Sebuah benih sintetik didefinisikan
sebagai embrio somatik yang direkayasa untuk digunakan praktis dalam produksi tanaman komersial (Gray dan Purohit, 1991). Aplikasi untuk
benih sintetik bervariasi tergantung pada kecanggihan relatif sistem produksi yang ada untuk tanaman tertentu
dan kesempatan untuk perbaikan.
Tunas sel meristem mempertahankan kapasitas embrio untuk pembelahan
terbatas.
Isolated eksplan meristem kecil membutuhkan media kultur yang lebih kompleks untuk bertahan hidup.
Meristem dan kultur meristem tip adalah metode untuk pemberantasan penyakit.
kultur Tunas menyediakan sarana untuk berkembang biak chimeras periclinal.
Sitokinin mengganggu dominasi apikal dan meningkatkan produksi menembak aksila.
Peningkatan konsentrasi auksin meningkatkan perakaran Persentase dan jumlah akar, tetapi menurunkan pemanjangan akar.
Efek akumulasi negatif dari auksin digunakan untuk Tahap III perakaran dapat mempengaruhi kelangsungan hidup dan pertumbuhan in vitro mantan plantlet.
Isolated eksplan meristem kecil membutuhkan media kultur yang lebih kompleks untuk bertahan hidup.
Meristem dan kultur meristem tip adalah metode untuk pemberantasan penyakit.
kultur Tunas menyediakan sarana untuk berkembang biak chimeras periclinal.
Sitokinin mengganggu dominasi apikal dan meningkatkan produksi menembak aksila.
Peningkatan konsentrasi auksin meningkatkan perakaran Persentase dan jumlah akar, tetapi menurunkan pemanjangan akar.
Efek akumulasi negatif dari auksin digunakan untuk Tahap III perakaran dapat mempengaruhi kelangsungan hidup dan pertumbuhan in vitro mantan plantlet.
Tidak ada sambungan ke sistem vaskular dari batang
Sebuah meristem apikal dicotyledonous menembak khas terdiri dari kubah berlapis aktif membagi sel yang terletak di ujung ekstrim menembak, dan ukuran sekitar 0,1 sampai 0,2 mm dengan diameter dan 0,2 sampai 0,3 mm panjang.
Meristem apikal tidak memiliki koneksi ke sistem pembuluh darah batang. Di bawah meristem apikal, daerah lokal pembelahan sel dan pemanjangan merupakan situs baru berkembang primordia daun.
Tunas lateral, masing-masing berisi meristem apikal, mengembangkan dalam axils daun subtending. Dalam tanaman utuh, perkembangan dari tunas lateral biasanya dihambat oleh dominasi apikal tunas ujung terminal.
Pertumbuhan tunas terorganisir dari meristem apikal tanaman berpotensi terbatas dan dikatakan tak tentu.
Namun, meristem apikal menembak dapat menjadi berkomitmen untuk pembentukan organ determinate seperti bunga.
Sebuah meristem apikal dicotyledonous menembak khas terdiri dari kubah berlapis aktif membagi sel yang terletak di ujung ekstrim menembak, dan ukuran sekitar 0,1 sampai 0,2 mm dengan diameter dan 0,2 sampai 0,3 mm panjang.
Meristem apikal tidak memiliki koneksi ke sistem pembuluh darah batang. Di bawah meristem apikal, daerah lokal pembelahan sel dan pemanjangan merupakan situs baru berkembang primordia daun.
Tunas lateral, masing-masing berisi meristem apikal, mengembangkan dalam axils daun subtending. Dalam tanaman utuh, perkembangan dari tunas lateral biasanya dihambat oleh dominasi apikal tunas ujung terminal.
Pertumbuhan tunas terorganisir dari meristem apikal tanaman berpotensi terbatas dan dikatakan tak tentu.
Namun, meristem apikal menembak dapat menjadi berkomitmen untuk pembentukan organ determinate seperti bunga.
Myo-inositol
Myo-inositol atau meso-inositol adalah konstituen alami dari tanaman dan sebagai fosfatidil inositol-bisa menjadi faktor penting dalam fungsi membran
Pada tumbuhan inositol sebagai inositol fosfat dapat bertindak sebagai utusan kedua tindakan utama auksin. Mungkin memiliki peran sebagai pembawa dan penyimpanan IAA sebagai IAA-myo-inositol ester.
Dalam budaya jaringan tanaman myo-inositol bisa menjadi prekursor penting dalam biosintesis jalur yang mengarah ke pembentukan pektin dan hemiselulosa yang dibutuhkan dalam sintesis dinding sel (Loewus et al, 1962;. Verma dan Dougall, 1979) dan mungkin memiliki peran dalam penyerapan dan pemanfaatan ion (Kayu dan Braun, 1961).
Myo-inositol atau meso-inositol adalah konstituen alami dari tanaman dan sebagai fosfatidil inositol-bisa menjadi faktor penting dalam fungsi membran
Pada tumbuhan inositol sebagai inositol fosfat dapat bertindak sebagai utusan kedua tindakan utama auksin. Mungkin memiliki peran sebagai pembawa dan penyimpanan IAA sebagai IAA-myo-inositol ester.
Dalam budaya jaringan tanaman myo-inositol bisa menjadi prekursor penting dalam biosintesis jalur yang mengarah ke pembentukan pektin dan hemiselulosa yang dibutuhkan dalam sintesis dinding sel (Loewus et al, 1962;. Verma dan Dougall, 1979) dan mungkin memiliki peran dalam penyerapan dan pemanfaatan ion (Kayu dan Braun, 1961).
Haploids dapat
dihasilkan dari gametophytes
laki-laki (androgenesis) atau gametophytes
perempuan (gynogenesis).
Gynogenesis dapat dirangsang dalam ovula dibuahi atau budaya ovarium.
Keberhasilan kultur haploid tergantung pada genotipe, media, dan kondisi budaya.
Tahap perkembangan mikrospora pada saat budaya adalah penting untuk keberhasilan androgenesis.
Kromosom haploids dua kali lipat (diploid) yang berguna dalam pemuliaan proyek.
Gynogenesis dapat dirangsang dalam ovula dibuahi atau budaya ovarium.
Keberhasilan kultur haploid tergantung pada genotipe, media, dan kondisi budaya.
Tahap perkembangan mikrospora pada saat budaya adalah penting untuk keberhasilan androgenesis.
Kromosom haploids dua kali lipat (diploid) yang berguna dalam pemuliaan proyek.
Kemampuan
untuk menghasilkan
tanaman haploid adalah aset yang luar biasa dalam studi pemuliaan
genetik dan tanaman.
Studi heritabilitas disederhanakan karena, dengan hanya satu set kromosom, mutasi resesif yang mudah diidentifikasi.
Selain itu, dua kali lipat jumlah kromosom dari haploid untuk menghasilkan hasil haploid dua kali lipat di sebuah pabrik sepenuhnya homozigot.
Secara teoritis, genotipe hadir antara sekelompok besar haploids dua kali lipat yang berasal dari sebuah hibrida F1 mewakili dalam bentuk tetap genotipe yang diharapkan dari populasi F2.
Penggunaan haploids dua kali lipat dalam program pemuliaan sehingga dapat sangat mengurangi waktu yang dibutuhkan untuk pengembangan kultivar ditingkatkan.
Untuk menjadi paling berguna, sejumlah besar haploids dari berbagai genotipe yang diperlukan.
Studi heritabilitas disederhanakan karena, dengan hanya satu set kromosom, mutasi resesif yang mudah diidentifikasi.
Selain itu, dua kali lipat jumlah kromosom dari haploid untuk menghasilkan hasil haploid dua kali lipat di sebuah pabrik sepenuhnya homozigot.
Secara teoritis, genotipe hadir antara sekelompok besar haploids dua kali lipat yang berasal dari sebuah hibrida F1 mewakili dalam bentuk tetap genotipe yang diharapkan dari populasi F2.
Penggunaan haploids dua kali lipat dalam program pemuliaan sehingga dapat sangat mengurangi waktu yang dibutuhkan untuk pengembangan kultivar ditingkatkan.
Untuk menjadi paling berguna, sejumlah besar haploids dari berbagai genotipe yang diperlukan.
androgenesis
PENGEMBANGAN HAPLOIDS
Tanaman haploid berkembang dari kultur antera baik secara langsung atau tidak langsung melalui fase kalus.
Androgenesis langsung, bagaimanapun, bukanlah sebuah suspensor atau endosperma hadir.
Pada tahap globular pembangunan, sebagian besar embrio dilepaskan dari dinding sel serbuk sari (exine).
Mereka terus berkembang, dan setelah 4 sampai 8 minggu, kotiledon terungkap dan plantlet muncul dari anter
PENGEMBANGAN HAPLOIDS
Tanaman haploid berkembang dari kultur antera baik secara langsung atau tidak langsung melalui fase kalus.
Androgenesis langsung, bagaimanapun, bukanlah sebuah suspensor atau endosperma hadir.
Pada tahap globular pembangunan, sebagian besar embrio dilepaskan dari dinding sel serbuk sari (exine).
Mereka terus berkembang, dan setelah 4 sampai 8 minggu, kotiledon terungkap dan plantlet muncul dari anter
Media yang padat atau cair
Media kultur antera sering dipadatkan dengan menggunakan agar-agar. Karena agar mungkin mengandung senyawa penghambat untuk proses androgenik dalam beberapa spesies, penggunaan agen pembentuk gel alternatif telah diselidiki.
Ficoll, Gelrite ™, agarosa, dan pati telah terbukti unggul untuk agar untuk memperkuat media yang anter budaya di berbagai spesies
Penggunaan medium cair telah dianjurkan oleh beberapa peneliti sebagai cara untuk menghindari zat-zat yang berpotensi penghambatan di agen pembentuk gel.
Anter dapat ditempatkan pada permukaan medium, membentuk apa yang disebut alternatif, mikrospora dapat diisolasi dan dikultur secara langsung dalam media cair "budaya mengambang."
Media kultur antera sering dipadatkan dengan menggunakan agar-agar. Karena agar mungkin mengandung senyawa penghambat untuk proses androgenik dalam beberapa spesies, penggunaan agen pembentuk gel alternatif telah diselidiki.
Ficoll, Gelrite ™, agarosa, dan pati telah terbukti unggul untuk agar untuk memperkuat media yang anter budaya di berbagai spesies
Penggunaan medium cair telah dianjurkan oleh beberapa peneliti sebagai cara untuk menghindari zat-zat yang berpotensi penghambatan di agen pembentuk gel.
Anter dapat ditempatkan pada permukaan medium, membentuk apa yang disebut alternatif, mikrospora dapat diisolasi dan dikultur secara langsung dalam media cair "budaya mengambang."
Metode transformasi
ž Metode senjata gen atau penembakan mikro-proyektil.
ž Metode ini sering digunakan pada spesies jagung
dan padi.
ž Untuk melakukannya, digunakan senjata yang dapat
menembakkan mikro-proyektil berkecepatan tinggi ke dalam sel tanaman.
ž Mikro-proyektil tersebut akan mengantarkan DNA
untuk masuk ke dalam sel tanaman
ž Metode transformasi yang diperantarai oleh Agrobacterium
tumefaciens.
ž Bakteri Agrobacterium tumefaciens dapat
menginfeksi tanaman secara alami karena memiliki plasmid Ti, suatu vektor
(pembawa DNA) untuk menyisipkan gen asing.
ž Di dalam plasmid Ti terdapat gen yang
menyandikan sifat virulensi untuk menyebabkan penyakit tanaman tertentu.
ž Gen asing yang ingin dimasukkan ke dalam tanaman
dapat disisipkan di dalam plasmid Ti.
ž Selanjutnya, A. tumefaciens secara
langsung dapat memindahkan gen pada plasmid tersebut ke dalam genom (DNA)
tanaman.
ž Setelah DNA asing menyatu dengan DNA tanaman
maka sifat-sifat yang diinginkan dapat diekspresikan tumbuhan
ž Metode elektroporasi.
ž Pada metode elektroporasi ini, sel tanaman yang
akan menerima gen asing harus mengalami pelepasan dinding sel hingga menjadi
protoplas (sel yang kehilangan dinding sel).
ž Selanjutnya sel diberi kejutan listrik dengan
voltase tinggi untuk membuka pori-pori membran sel tanaman sehingga DNA asing
dapat masuk ke dalam sel dan bersatu (terintegrasi) dengan DNA kromosom
tanaman.
ž Kemudian, dilakukan proses pengembalian dinding
sel tanaman.
Langkah Dasar
Rekayasa Genetika
Pemotongan DNA:
Enzim restriksi: enzim bakteri yang mengenali dan mengikat untuk sekuens pendek DNA yang spesifik, dan kemudian lucu DNA antara nukleotida tertentu dalam urutan.
Vektor: agen digunakan untuk membawa gen yang diinginkan - biasanya plasmid
Plasmid: molekul DNA sirkular yang meniru.
Pemotongan DNA:
Enzim restriksi: enzim bakteri yang mengenali dan mengikat untuk sekuens pendek DNA yang spesifik, dan kemudian lucu DNA antara nukleotida tertentu dalam urutan.
Vektor: agen digunakan untuk membawa gen yang diinginkan - biasanya plasmid
Plasmid: molekul DNA sirkular yang meniru.
Membuat DNA
rekombinan
DNA fragmen bunga (yang telah dipotong) digabungkan dengan vektor.
DNA ligase - ikatan enzim 2 ujung fragmen ke vektor.
kloning
Kloning gen: proses pembuatan banyak salinan gen
Bakteri berkembang biak dengan pembelahan biner.
DNA fragmen bunga (yang telah dipotong) digabungkan dengan vektor.
DNA ligase - ikatan enzim 2 ujung fragmen ke vektor.
kloning
Kloning gen: proses pembuatan banyak salinan gen
Bakteri berkembang biak dengan pembelahan biner.
penyaringan
Sel-sel yang telah menerima gen dari bunga dipisahkan.
Sel-sel kemudian terus menghasilkan protein dikodekan oleh gen
Sel-sel yang telah menerima gen dari bunga dipisahkan.
Sel-sel kemudian terus menghasilkan protein dikodekan oleh gen
Pemotongan DNA
& Membuat DNA
rekombinan
Bagaimana Enzim restriksi bekerja:
Para Enzim mengenali urutan tertentu pada Plasmid Manusia dan Bakteri
Para Enzim memotong untai.
Memotong menghasilkan fragmen DNA dengan helai pendek pada setiap akhir yang melengkapi satu sama lain
"Sticky Berakhir"
Kedua DNA manusia dan Plasmid "Open Up" dengan ujung lengket yang sama yang tersisa
Mereka Bind Bersama
Bagaimana Enzim restriksi bekerja:
Para Enzim mengenali urutan tertentu pada Plasmid Manusia dan Bakteri
Para Enzim memotong untai.
Memotong menghasilkan fragmen DNA dengan helai pendek pada setiap akhir yang melengkapi satu sama lain
"Sticky Berakhir"
Kedua DNA manusia dan Plasmid "Open Up" dengan ujung lengket yang sama yang tersisa
Mereka Bind Bersama
Konfirmasi dari
Kloning Gen
Salah satu metode yang digunakan mengidentifikasi gen tertentu disebut Blot Selatan
langkah-langkah:
Potong DNA dari bakteri dengan enzim restriksi.
Fragmen DNA dipisahkan oleh gel direndam dalam larutan kimia.
Gel elektroforesis - menggunakan medan listrik dalam gel untuk molekul terpisah oleh ukuran mereka.
Salah satu metode yang digunakan mengidentifikasi gen tertentu disebut Blot Selatan
langkah-langkah:
Potong DNA dari bakteri dengan enzim restriksi.
Fragmen DNA dipisahkan oleh gel direndam dalam larutan kimia.
Gel elektroforesis - menggunakan medan listrik dalam gel untuk molekul terpisah oleh ukuran mereka.
DNA bermuatan
negatif dimasukkan ke dalam
sumur.
Mereka tertarik ke kutub positif dari medan listrik.
Fragmen DNA Terkecil bergerak tercepat.
Mereka tertarik ke kutub positif dari medan listrik.
Fragmen DNA Terkecil bergerak tercepat.
DNA yang dipisahkan kemudian ditransfer ke kertas filter (dihapus) dan
solusi probe ditambahkan.
Probe: radioaktif RNA atau potongan DNA untai tunggal yang saling melengkapi gen yang diinginkan
Hanya fragmen DNA komplementer untuk probe akan membentuk dan mengikat pita.
Probe: radioaktif RNA atau potongan DNA untai tunggal yang saling melengkapi gen yang diinginkan
Hanya fragmen DNA komplementer untuk probe akan membentuk dan mengikat pita.
Mengapa ini?
Koloni bakteri dapat digunakan untuk menghasilkan jumlah besar protein (digunakan untuk belajar atau membuat obat)
Koloni bakteri dapat digunakan untuk menghasilkan jumlah besar protein (digunakan untuk belajar atau membuat obat)
Rekayasa genetika Obat dan Vaksin
Saat ini, perusahaan farmasi di seluruh dunia memproduksi protein penting menggunakan rekayasa genetika.
Vaksin: larutan yang mengandung semua atau bagian dari versi patogen berbahaya; digunakan untuk mencegah penyakit virus (tidak merespon obat)
Banyak vaksin yang dibuat dengan menggunakan rekayasa genetika
Saat ini, perusahaan farmasi di seluruh dunia memproduksi protein penting menggunakan rekayasa genetika.
Vaksin: larutan yang mengandung semua atau bagian dari versi patogen berbahaya; digunakan untuk mencegah penyakit virus (tidak merespon obat)
Banyak vaksin yang dibuat dengan menggunakan rekayasa genetika
DNA sidik
jari
DNA sidik jari: suatu pola pita gelap pada film fotografi yang dibuat ketika sebuah fragmen DNA individu pembatasan dipisahkan dengan elektroforesis gel, diperiksa, dan terkena film sinar-X.
Sidik jari DNA dapat digunakan untuk menetapkan ayah, mengidentifikasi kelainan genetik, atau dalam forensik (studi ilmiah tentang penyebab cedera atau kematian dalam kegiatan kriminal)
DNA sidik jari: suatu pola pita gelap pada film fotografi yang dibuat ketika sebuah fragmen DNA individu pembatasan dipisahkan dengan elektroforesis gel, diperiksa, dan terkena film sinar-X.
Sidik jari DNA dapat digunakan untuk menetapkan ayah, mengidentifikasi kelainan genetik, atau dalam forensik (studi ilmiah tentang penyebab cedera atau kematian dalam kegiatan kriminal)
meningkatkan Tanaman
Insinyur genetik dapat menambahkan karakteristik menguntungkan bagi tanaman
Tahan terhadap serangga (pestisida tidak lagi perlu); resisten terhadap pembunuh gulma (tanaman sehingga tidak akan mati, tapi gulma akan); perbaikan nutrisi - padi + jagung
Insinyur genetik dapat menambahkan karakteristik menguntungkan bagi tanaman
Tahan terhadap serangga (pestisida tidak lagi perlu); resisten terhadap pembunuh gulma (tanaman sehingga tidak akan mati, tapi gulma akan); perbaikan nutrisi - padi + jagung
Agrobacterium
Menginfeksi di mahkota akar atau hanya di bawah garis tanah.
Dapat bertahan hidup independen dari tanaman inang dalam tanah.
Menginfeksi tanaman melalui istirahat atau luka.
Umum penyakit semak berkayu, tanaman herba, dicots.
Galls (tumor Mahkota empedu) adalah kutil-seperti bola struktur mirip dengan tumor.
Menginfeksi di mahkota akar atau hanya di bawah garis tanah.
Dapat bertahan hidup independen dari tanaman inang dalam tanah.
Menginfeksi tanaman melalui istirahat atau luka.
Umum penyakit semak berkayu, tanaman herba, dicots.
Galls (tumor Mahkota empedu) adalah kutil-seperti bola struktur mirip dengan tumor.
Langkah Agrobacterium-tanaman
interaksi sel
Sel-sel pengakuan
Transduksi sinyal dan aktivasi transkripsi gen virtual_
Suami-istri metabolisme DNA
transportasi antar
nuklir impor
T-DNA integrasi
Sel-sel pengakuan
Transduksi sinyal dan aktivasi transkripsi gen virtual_
Suami-istri metabolisme DNA
transportasi antar
nuklir impor
T-DNA integrasi
T-DNA
DNA transfer (disingkat T-DNA) adalah DNA ditransfer dari menginduksi tumor-(Ti) plasmid dari beberapa spesies bakteri Agrobacterium tumefaciens seperti Agrobacterium rhizogenes dan.
T-DNA membawa gen yang terlibat dalam sintesis hormon pertumbuhan tanaman (auksin, sintesis auksin; CYT, sitokinin sintesis) dan produksi asam amino dengan berat molekul rendah dan derivatif gula fosfat disebut opines (OCS, octopine; mas, mannopine, dan ags , agropine).
Agrobacteria biasanya diklasifikasikan berdasarkan jenis opines ditentukan oleh bakteri T-DNA.
DNA transfer (disingkat T-DNA) adalah DNA ditransfer dari menginduksi tumor-(Ti) plasmid dari beberapa spesies bakteri Agrobacterium tumefaciens seperti Agrobacterium rhizogenes dan.
T-DNA membawa gen yang terlibat dalam sintesis hormon pertumbuhan tanaman (auksin, sintesis auksin; CYT, sitokinin sintesis) dan produksi asam amino dengan berat molekul rendah dan derivatif gula fosfat disebut opines (OCS, octopine; mas, mannopine, dan ags , agropine).
Agrobacteria biasanya diklasifikasikan berdasarkan jenis opines ditentukan oleh bakteri T-DNA.
ž Plasmid Ti adalah vektor alamiah yang digunakan untuk
mentransfer DNA ke dalam sel tanaman.
ž Bakteri yang membawa plasmid Ti (contohnya:
Agrobacterium tumefaciens) dapat menyebabkan tumor pada tanaman yang disebut crown
gall, terutama tanaman dikotil.
ž Pada sebagian besar plasmid Ti, terdapat lima
kompleks gen, yaitu T-DNA (bagian yang ditransfer dan menyatu dengan genom
tanaman sehingga), gen virulen (vir) yang terdiri dari 50 kilo-basa
untuk mengatur proses transfer T-DNA ke dalam DNA tanaman, gen tra/trb
yang mengatur perpindahan plasmid Ti antarbakteri, bagian yang mengatur sistem
replikasi plasmid, dan bagian gen yang menyandikan molekul opin.
ž Molekul opin ini akan dihasilkan oleh jaringan
tanaman yang terinfeksi bakteri pembawa plasmid Ti
Agrobacterium-diinduksi tumor tanaman mengandung konsentrasi tinggi dari:
Tanaman hormon (auksin, sitokinin)
Opines (octopine, nopaline)
Tanaman hormon (auksin, sitokinin)
Opines (octopine, nopaline)
Agrobacterium-host pengakuan
sel adalah proses dua langkah
Langkah 1.Loosely terikat: polisakarida asetat disintesis.
Langkah mengikat 2.Strong: bakteri terikat mensintesis filamen selulosa untuk menstabilkan pengikatan awal, sehingga hubungan erat antara Agrobacterium dan sel inang.
Langkah 1.Loosely terikat: polisakarida asetat disintesis.
Langkah mengikat 2.Strong: bakteri terikat mensintesis filamen selulosa untuk menstabilkan pengikatan awal, sehingga hubungan erat antara Agrobacterium dan sel inang.
0 komentar:
Posting Komentar